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En ausencia de visión formal, la retina puede actuar como un sensor de las condiciones ambientales de iluminación constituyéndose en la vía de entrada de información fótica que sincroniza la fisiología y conducta de los organismos con el ciclo luz-oscuridad regulando diferentes funciones no-visuales (reflejo pupilar, actividad, etc.). Para esto, las células ganglionares retinianas (CGRs) proyectan a diversas áreas del cerebro formando un circuito no-visual. La retina contiene un reloj autónomo que genera ritmos diarios en diversas funciones bioquímicas y fisiológicas, que le permite predecir el tiempo y anticiparse en su fisiología a los cambios lumínicos ambientales. Las CGRs de pollo poseen osciladores autónomos que generan ritmos diarios en los niveles de melatonina con máximos durante el día (Garbarino et al., 2004b). Mediante un modelo animal de ceguera en pollos (GUCY1*) con células fotorreceptoras no funcionales, se estudió la percepción de luz observándose que células de la retina interna-presumiblemente CGRs- serían fotosensibles y encargadas de mediar el reflejo pupilar y sincronizar los ritmos diarios de alimentación (Valdez et al., 2009). CGRs en cultivo responden a la luz a través de una cascada de fototransducción similar a la de invertebrados (Contin et al., 2006). La convergencia de osciladores y fotorreceptores en la población de CGRs podría contribuir al control temporal de la fisiología del organismo y regulación de funciones no visuales. Estudios en cultivos primarios de CGRs de pollo, de la línea inmortalizada de CGRs de rata (RGC-5) y en pollos GUCY1* tendrán como objetivos: i) Identificar los fotopigmentos no-visuales responsables de la detección de luz en CGRs, y en pollos GUCY1* mediante estudios moleculares y de pérdida de función; ii) Caracterizar la cascada de fototransducción de CGRs midiendo los cambios en los niveles de Ca2+ intracelular y la participación del sistema de fosfoinosítidos mediante estudios bioquímicos, farmacológicos y de fluorescencia con biosensores adecuados; iii) Elucidar el tipo de cromóforo involucrado en la fotocascada de CGRs y el ciclo de regeneración del mismo; iv) Investigar la respuesta a la luz (reflejo pupilar, conducta, etc.) y la síntesis de melatonina en pollos GUCY1* expuestos a luces de distintas longitudes de onda en condiciones de oclusión retinal, de fotorreceptores extra-oculares, y exposición de la glándula pineal (fotorreceptora en aves); v) Investigar el rol de las CGRs en el sistema circadiano estudiando la expresión de genes reloj, su capacidad para sintetizar melatonina y la regulación por luz y dopamina. Estos estudios permitirán profundizar el conocimiento sobre la capacidad fotorreceptora-no visual de las CGRs y los mecanismos moleculares y enzimáticos que operan en las mismas.
Asimismo, células en cultivo sincronizadas con un shock de suero presentan oscilaciones circadianas en la expresión de distintos genes (Balsalobre et al., 1998) y en la biosíntesis de sus fosfolípidos (Marquez et al., 2004).
La continuidad de estos estudios permitirá profundizar el conocimiento de cómo dichas células oscilan, las actividades fisiológicas que modulan, los mecanismos moleculares que operan en las mismas y su potencial capacidad fotorreceptora-no visual en la retina.
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Integrantes actuales del laboratorio; Investigadores bajo la dirección o codirección del Dr. Mario Guido |
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Dra. Maria Ana Contin
Investigadora Adjunta del CONICET,
email: mcontin@fcq.unc.edu.ar |
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Dr. Eduardo Garbarino Pico
Investigador Adjunto del CONICET,
email:garba@mail.fcq.unc.edu.ar
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Dra. Paula Nieto
Becaria postdoctoral del CONICET,
email: paula@mail.fcq.unc.edu.ar
Director: Dr. Francisco Tamarit, Codirector: Dr. Mario E. Guido
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Estudiantes de la carrera de Doctorado de la Facultad de Ciencias Químicas, UNC |
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Lic. en Qca. Victoria A. Acosta Rodriguez
Becaria FONCYT
email:vacosta@mail.fcq.unc.edu.ar |
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Lic en Bioq. Nicolás M. Díaz,
Beca CONICET tipo I |
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Lic en Biol. Mol. Luis P. Morera,
Beca CONICET tipo I
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| Investigadores formados en este laboratorio, Tesis Doctorales entregadas por la Facultad de Ciencias Químicas, UNC.
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Dr. Eduardo Garbarino Pico
Tema: “Regulación circadiana de los metabolismos de fosfolípidos y melatonina en la retina de pollo”.
Fecha: Agosto de 1999- Diciembre de 2003. Defensa: 26 Diciembre de 2003.
Calificación: SOBRESALIENTE. |
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Dr. Sebastián Márquez
Tema: "Regulación circadiana del metabolismo de fosfolípidos en células en
cultivos. Mecanismos moleculares y participación de genes reloj"
Fecha: Agosto 2002 Marzo 2006. Defensa: 27 Marzo de 2006.
Calificación: SOBRESALIENTE.. |
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Dr. Diego Valdez
Tema: “Mecanismos de control circadiano y fotopercepción en la retina de pollos con degeneración retiniana (GUCY1 o Rd).
Fecha: Diciembre de 2003-Junio 2009. Defensa: 17 de junio de 2009.
Calificación: SOBRESALIENTE. . |
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Dra. Paula Nieto
Tema: "Caracterización de una línea inmortalizada de células ganglionares de retina de mamíferos en cultivo como osciladores autónomos y potenciales fotorreceptores”. Fecha: Octubre de 2004-Junio 2010. Defensa: 2 de julio de 2010. Calificación: SOBRESALIENTE. |
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Dra. Estela María Galván.
Tema: "Componentes moleculares involucrados en los mecanismos de fotopercepción no visual en células ganglionares de retina de pollo.”. Fecha: Abril de 2006 al presente. Defensa: 20 de Abril 2011. Calificación: SOBRESALIENTE |
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| Publicaciones seleccionadas del laboratorio |
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- “Early Onset and Temporo-Spatial Switch of Melanopsin Isoforms Expression in The Developing Chicken Retina” Verra DM, Contín MA, D. Hicks, Guido ME. Investigative Ophthalmology and Visual Sciences (IOVS), ISSN: 0146-0404, 52(8):5111-20. Print 2011 Jul., 2011.
- “Inner retinal circadian clocks and non-visual photoreceptors: novel players in the circadian system”. Guido ME, Garbarino E, Contin MA, Valdez D, Nieto P, Verra D, Acosta V, de Zabalia N, Rosenstein RE. Review. Progress in Neurobiology, ISSN 0301-0082, Dec;92(4):484-504. Epub 2010 Aug 22, 2010.
- “Differential responses of the mammalian retinal ganglion cell line RGC-5 to physiological stimuli and trophic factors”. Nieto P., Acosta V., Valdez D. and Guido ME., Neurochemistry International ISSN 0197- 0186, 57, pp. 216-226, 2010.
- “Light-activation of the Phosphoinositide Cycle in Intrinsically Photosensitive Chicken Retinal Ganglion Cells:” Contín MA, Verra DM., Salvador G, Ilincheta M, Giusto NM. and Guido ME. Investigative Ophthalmology and Visual Sciences (IOVS), ISSN: 0146-0404, 51(11):5491-8, 2010.
- “A Non-Mammalian Vertebrate Model of Blindness Reveals Functional Photoreceptors in the Inner Retina”. D. J. Valdez, P. S. Nieto, E. Garbarino-Pico, L. B. Avalle, H. Díaz-Fajreldines, C. Schrurer, K. Cheng, and M. E. Guido, The FASEB Journal, ISSN 0892-6638, vol 23 (4), 1186-1195, April 2009, Dec 12., [Epub ahead of print] 2008.
- “An Invertebrate-like Phototransduction Cascade Mediates Light Detection in the Chicken Retinal Ganglion Cells”, M. A. Contin, D. M. Verra and M.E. Guido, The FASEB J ISSN 0892-6638, 20: 2648-2650, 2006.
- “Chicken Embryo Retinal Ganglion Cells, A Tool For Neuronal Research”. Panzetta, P; Brocco, M. A.; Contin, M A; Carpentieri, A. R. and Guido, M. E. Current Trends in Neurology, Volume 2, 47-57, 2006. ISSN 0972-8252, cited in Chemical Abstracts.
- “Rhythms of Phospholipid biosynthesis in the Retina Inner Nuclear Layer Cells”. Garbarino-Pico E, Valdez D., Contin MA, Pasquaré S., Castagnet P., Giusto N. M., Caputto B.L and Guido M.E. Neurochemistry International, 47(4): 260-270, 2005.
- “Retinal ganglion cells are autonomous circadian oscillators synthesizing N-acetylserotonin during the day”. Garbarino Pico E, Carpentieiri AR, Contin M A, Keller MI, Brocco M, Panzetta P, Rosenstein R, Caputto BL and Guido M.E. The Journal of Biological Chemistry ISSN 0021-9258, 279(49):51172-81, 2004.
- “The synthesis of Retinal Ganglion Cell Phospholipids is under control of an Endogenous Circadian Clock. Daily Variations in Phospholipid Synthesizing Enzyme Activities” by E. Garbarino-Pico, A.R. Carpentieri, P. Castagnet, S. Pasquaré, N. M. Giusto, B.L. Caputto and Guido M.E. Journal of Neuroscience Research ISSN 0360-4012, 76(5):642-52, 2004.
- “The metabolism of phospholipids oscillates rhythmically in cultures of fibroblasts and is regulated by the clock protein PERIOD 1”. S. Marquez, P. Crespo, V. Carlini, E. Garbarino-Pico, R. Baler, B.L. Caputto and M.E. Guido. The FASEB Journal, ISSN 0892-6638, Mar;18(3):519-21, Express article 10.1096/fj.03-0417fje Published online, January 6, 2004.
- “Circadian phototransduction and the regulation of biological rhythms”. M.E. Guido, AR Carpentieiri, E. Garbarino Pico. Neurochemical Research ISSN 0364-3190, 27 (11) 1473-1489, 2002.
- “Shedding light on the metabolism of phospholipids in the retina”. BL Caputto and M.E. Guido. Biochemica et Biophysica Acta, Review, Jun 13;1583(1):1-12, 2002.
- “Circadian regulation of phospholipid metabolism in retinal photoreceptors and ganglion cells” M.E. Guido, E. Garbarino Pico and B.L. Caputto, Journal of Neurochemistry ISSN 0022-3042, 76 (3) 835-845, 2001.
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